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科目三上车准备步骤顺序是一踩二挂三打四抬五松。

一踩二挂三打四抬五松含义：

一踩，左脚将离合踏板完全踩下，二挂，右手将档位挂入1档；三打，往下打转向灯开关，左转向灯必须保持3秒以上；四抬，左脚缓慢抬离合踏板至半联动状态；五松，放下手刹，轻轻加油门完成起步。

科目三道路驾驶技能考试内容：

考试上车准备、起步、直线行驶、加减挡位操作、变更车道、靠边停车、直行通过路口、路口左转弯、路口右转弯、通过人行横道线、通过学校区域、通过公共汽车站、会车、超车、掉头、夜间灯光模拟考试。